A albumina de soro humana de recombinação TEM é estruturalmente e bioquimicamente equivalente ao pHSA

A albumina de soro humana de recombinação TEM é estruturalmente e bioquimicamente equivalente ao pHSA

Descrição

A albumina de soro humana de recombinação de Healthgen Biotech é origem animal livre, que evitam eficazmente todo o risco potencial dos contaminadores animais, das bactérias, dos prião, do vírus e de doença contagioso da proteína. A plataforma específica da expressão do endosperma do arroz é fácil ser em grande escala. O endosperma do arroz tem o corpo da proteína, que pode mantém a estabilidade e a bioatividade das proteínas. Presentemente, a capacidade de produção é quase 1000 quilogramas/ano.

OsrHSA é estruturalmente e bioquimicamente equivalente ao pHSA.

O OsrHSA expressado tem a mesmos massa molecular, sequência de ácido aminado, término do n e do C, e ponto de derretimento que o pHSA. O espectro circular do dicroísmo (CD) de OsrHSA na região próxima e distante-UV combinou que do pHSA, indicando que a estrutura secundária e terciária de OsrHSA é idêntica àquelas do pHSA. A análise espectroscópica confirmou mais que OsrHSA tem a mesma conformação que o pHSA.

Para caracterizar a estrutura de OsrHSA, um complexo ácido OsrHSA-myristic foi cristalizado, e a estrutura foi resolvida pela substituição molecular que usa o previamente determinado TEM a estrutura em um refinamento de 2,5 Å (código de identificação 1BJ5 do PDB), apresentando um valor R-livre final de 0,303. Um cristal de duas moléculas independentes de OsrHSA foi obtido em uma unidade assimétrica. A estrutura total de OsrHSA é uma forma do coração formada por três domínios helicoidais, designou I, II, e III, e com os ácidos myristic limitados nas cavidades hidrofóbicas. Uma superposição de todos os átomos do α-carbono das estruturas de cristal de OsrHSA e de pHSA conduziu a um rmsd de 0,67 Å para o código de identificação 2I2Z de PBD e de 0,69 Å para 1BJ5.

Nenhuma diferença óbvia em conformações da principal-corrente foi identificada entre o pHSA e o OsrHSA, que demonstra que OsrHSA em pilhas do endosperma do arroz está dobrado na estrutura idêntica como o pHSA no plasma de sangue. Como esperado, 17 ligações de bissulfeto foram identificadas como ligações de bissulfeto genuínas, e um resíduo livre do cysteine (Cys) foi observado na posição 34. TEM é sabido para atuar como uma proteína de portador, principalmente através de dois locais de acoplamento para drogas e de 7-9 locais para os ácidos gordos (27). Oito ácidos myristic foram observados que limitado ao de recombinação TEM a molécula, e todos os locais obrigatórios de ácido gordo em OsrHSA estiveram identificados nos mesmos lugar que no pHSA. Dois locais drugbinding encontrados no pHSA estavam igualmente atuais em OsrHSA. O local I é uma cavidade hidrofóbica situada no subdomínio II, traçado pelos resíduos F211, W214, A215, e L238. Dois conjuntos de resíduos polares responsáveis para a interação da ligante foram povoados pelos ácidos aminados Y150, H242, R257, e K195, K199, R218, R222, respectivamente. O local II era um outro bolso hidrofóbica no subdomínio IIIA composto de L387, de Y411, de L453, de V433, e de L430. Uma região polar, composta de R410, K414, e S489, foi encontrada neste local obrigatório. A topologia estrutural destes locais obrigatórios em OsrHSA sugere que possa executar as mesmas funções biológicas que o pHSA.